文献调研肝炎肝纤维化肝硬化肝癌动
肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发生、发展是一个较长时间、多阶段的演变过程。流行病学调查研究发现90%的HCC病例都有未解决的炎症和严重纤维化(或肝硬化)的病史。
年Elsharkawy提出肝脏炎症→纤维化→癌轴(IFC)［1］。在研究肝癌的各位小主们科学研究过程中，肝炎-肝纤维化/肝硬化-肝癌动态动物模型的建立肯定是必不可少的了。
下面小编就为大家介绍一下本人通过查文献整理的肝炎-肝纤维化/肝硬化-肝癌动态动物模型的造模方法吧。
1.二乙基亚硝胺（DEN）诱发小鼠肝炎-肝纤维化/肝硬化-肝癌动态动物模型
1）自由饮用：用0.01%二乙基亚硝胺（DEN）溶液间断喂养SD大鼠诱发肝癌（饮用蒸馏水配成的0.01%DEN溶液，自由饮用8周，停药2周，此间断期，改为普通喂养，而后再继续给药喂养5周停药。
2）腹腔注射：二乙基亚硝胺（DEN）腹腔注射（50mg/Kg），2次/周，连续4周后改为腹腔注射（50mg/Kg）DEN，1次/周，至14周停止；对照组：生理盐水腹腔注射（0.1ml），2次/周，连续4周后改为腹腔注射（0.1ml）生理盐水，1次/周，至14周停止。
3）病理改变：给DEN第4周后，肝细胞点状坏死及炎性细胞浸润；8周时，肝细胞严重脂肪变性、灶性坏死，门管区出现纤维组织增生；9-12周时，增生的胶原束包绕并分割肝小叶，正常的肝小叶结构被破坏，假小叶形成；15周后存活大鼠均形成肝癌，肝癌细胞排列成条索状或团块状。
Fig.1.ThehepaticpathologicalchangesinDEN-inducedHCCrats(HE×).A:normalcontrolgroup;B:following4weeksofDENtreatment;C:following12weeksofDENtreatment;D:following16weeksofDENtreatment.
Fig.2.RepresentativeliversofmaleMUP-uPAmice5monthsaftertransplantationwithhepatocytesfromvehicle-orDEN-treatedmalemice.LiversectionswerestainedwithHEandalbuminantibody.Magnificationbar=μm.
2.4-二甲基氨基偶氮苯（DA）诱发大鼠肝癌模型
使用含有0.06％DAB的饲料喂养大鼠，同时控制饲料中维生素B2含量（不超过1.5-2mg/kg体重）。经4-6个月可诱发成功。
病理改变：早期（8周以前），炎性细胞浸润，肝窦淤血，肝细胞变性坏死明显，门管区卵圆细胞大量增生，并破坏及替代肝组织。中期（8-16周）肝组织钟出现散在的嗜酸性增生结节，出现典型的假小叶形成，小叶周围卵圆细胞及纤维组织明显增生。晚期（16周后）：动物明显消瘦，死亡增加，死亡动物多伴有腹水，肝脏多表现萎缩，肝脏表面粗糙，出现明显的癌结节，镜下见癌细胞排列成小梁状，粗梁状，腺样及实片状。
3.2-乙酰氨基芴（2-AAF）诱发动物肝癌
给成年大鼠含0.03％2AAF标准饲料，每日每只2-3mg2AAF，经3-4个月即可诱发成功。此方法也可用于诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔等动物肝癌。
4.亚胺基偶氮甲苯（OAAT）诱发小鼠肝癌
用1％OAAT苯溶液涂于动物两肩胛间皮肤上，隔日1次，每次2-3滴，一般涂次。7个月以上诱发肝肿瘤率55％。亦可用2.5mgOAAT溶于葵花籽油中，皮下注射C3H小鼠，每10天一次。
5.黄曲霉素诱发大鼠肝癌
在大鼠饲料中加入黄曲霉素，含0.-0.mg/kg，喂养6个月，诱发率达80％。
6.四氯化碳（CCL4）诱发小鼠肝癌
CCL4/橄榄油（配制体积比为25∶75）腹腔注射，剂量5μL·g-1，每周2次，并自由饮用8%乙醇水溶液，同时喂以正常小鼠饲料，连续20周可诱导出小鼠肝癌。
病理改变：第-阶段为肝纤维化前期，为诱癌第1-8周；第二阶段为肝纤维化期，为诱癌第9-12周；第三阶段为肝硬化及早期癌变期，为诱癌第13-16周；第四阶段为肝癌演进期，为诱癌的第17-20周。
7.二甲氨诱发肝癌模型
将二甲氨用食用菜油配制成3％的溶液，按98g精白碎米加2ml3%二甲氨溶液的比例配制饲料（相当于每克碎米含0.06mg二甲氨），喂养雄性大白鼠（体重-g）4-6周，停药1周（以精白碎米代替），后改用基础饲料加0.12％二甲氨继续喂养12-13周，即可诱发出肝癌。
8.黄曲霉素B2诱发麻鸭肝癌模型
采用半月龄雏鸭，自由食取肝癌高发区启东霉玉米配合饲料（内含黄曲霉素B1），同时饮高发区浅井水，直至动物自然死亡，可见麻鸭发生肝细胞癌。
在化学因素诱导肝癌动物模型的实验中，其中以二乙基亚硝胺（DEN）诱发肝癌模型为最常见，其方法最经典的是“饮水法”建立肝癌动物模型；英文文献中DEN诱导肝癌则主要是采用腹腔注射的方法。
成功建模后的肿瘤特点兼具肝炎、肝硬化的背景，与人类肝癌形成过程十分类似，为肝癌的研究提供了很好的借鉴方法。
References：
1.ElsharkawyAM,MannDA.Nuclearfactor-kappaBandthehepaticinflammation-fibrosis-canceraxis.Hepatology.;46(2):-7.
2.HeG,YuGY,TemkinV,etal.HepatocyteIKKbeta/NF-kappaBinhibitstumorpromotionandprogressionbypreventingoxidativestress-drivenSTAT3activation.CancerCell.;17(3):-97.
3.SongS,YuanP,LiP,WuH,LuJ,WeiW.Dynamicanalysisoftumor-associatedimmunecellsinDEN-inducedrathepatocellularcarcinoma.IntImmunopharmacol.;22(2):-9.
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